Proizvodi

LecA (PA-IL) je citotoksični lektin i adhezin koji proizvodi Pseudomonas aeruginosa koji veže hidrofobne galaktozide sa visokom specifičnošću i afinitetom.Koristeći lecA-egfp translacionu fuziju i imunoblot analizu ekstracelularnog matriksa biofilma, pokazujemo da je lecA eksprimiran u ćelijama uzgojenim u biofilmu.U statičkim testovima biofilma i na polistirenu i na nehrđajućem čeliku, dubina biofilma i površinska pokrivenost smanjeni su mutacijom lecA i poboljšani u soju PAO-P47 koji prekomjerno proizvodi LecA.Pokrivanje površine biofilma roditeljskim sojem, PAO-P47, ali ne i lecA mutantom na čeličnim kuponima, također je inhibirano rastom u prisustvu izopropil-beta-D-tiogalaktozida (IPTG) ili p-nitrofenil-alfa-D-galaktozida ( NPG).Nadalje, zreli biofilm divljeg tipa formiran u odsustvu ovih hidrofobnih galaktozida mogao bi se raspršiti dodatkom IPTG.Nasuprot tome, dodatak p-nitrofenil-alfa-L-fukoze (NPF) koja ima visok afinitet prema lektini P. aeruginosa LecB (PA-IIL) nije imao efekta na formiranje ili disperziju biofilma.Planktonski rast P. aeruginosa PAO1 nije bio pod uticajem prisustva IPTG, NPG ili NPF, niti je soj bio u stanju da iskoristi ove šećere kao izvore ugljika, što sugerira da su uočeni efekti na formiranje biofilma uzrokovani kompetitivnom inhibicijom LecA-liganda vezivanje.Slični rezultati su takođe dobijeni za biofilmove uzgajane u uslovima dinamičkog protoka na čeličnim kuponima, što sugeriše da LecA doprinosi arhitekturi biofilma P. aeruginosa u različitim uslovima sredine.

Alfa-L-fukozidaza (EC 3.2.1.51) sposobna da oslobodi t-fukozilni ostatak iz bočnog lanca ksiloglukanskih oligosaharida otkrivena je u listovima biljaka Arabidopsis.Štaviše, alfa-L-fukozidaza sa sličnom specifičnošću supstrata pročišćena je iz listova kupusa (Brassica oleracea) kako bi se dobila jedna traka na SDS-PAGE.Dvije peptidne sekvence su dobijene iz ove proteinske trake i korištene su za identifikaciju gena Arabidopsis koji kodira za alfa-fukozidazu koju predlažemo da nazovemo AtFXG1.Pored toga, pronađen je i gen Arabidopsis sa homologijom sa poznatim alfa-L-fukozidazama, a mi smo predložili da ga nazovemo kao AtFUC1.I AtFXG1 i ATFUC1 su heterologno eksprimirani u ćelijama Pichia pastoris i aktivnosti alfa-L-fukozidaze izlučene u medijum kulture.Alfa-L-fukozidaza koju kodira AtFXG1 bila je aktivna protiv oligosaharida iz ksiloglukana XXFG, kao i protiv 2'-fukozil-laktitola, ali ne i protiv p-nitrofenil-alfa-L-fukopiranozida.Međutim, heterologno izražen AtFUC1 bio je aktivan samo protiv 2'-fukozil-laktitola.Dakle, prvo mora biti povezano s metabolizmom ksiloglukana.