Proizvodi

Jedan od faktora koji sprečavaju kliničku primenu regenerativne medicine kod degenerativnih oboljenja hrskavice je odgovarajući izvor ćelija.Hondrociti, jedini tip ćelije hrskavice, uzgajani in vitro u uslovima kulture da bi se povećao broj ćelija, gube svoj fenotip zajedno sa sposobnošću stvaranja hijalinskog hrskavičnog tkiva.U ovoj studiji utvrđujemo da trodimenzionalni (3D) sistem kulture bez seruma i faktora rasta vraća sposobnost prolaznih hondrocita da formiraju tkivo hrskavice in vitro, proces koji uključuje sox9. omogućavaju ekspanziju broja ćelija (P2) i kultivišu se u visokoj gustoći na 3D membranama obloženim kolagenom tipa II u medijumu sa visokim sadržajem glukoze dopunjenim insulinom i deksametazonom (SF3D).Ćelije su karakterizirane nakon jednoslojne ekspanzije i nakon 3D kulture pomoću protočne citometrije, ekspresije gena i histologije.Okarakterisane su rane promene u putevima signalne transdukcije tokom rediferencijacije. P2 ćelije su pokazale profil antigena sličan progenitorima od 99% CD44(+) i 40% CD105(+) i profil ekspresije gena koji sugeriše interzonske ćelije.P2 u SF3D eksprimira hondrogene gene i akumulirani ekstracelularni matriks.Smanjenje regulacije inzulinskog receptora (IR) pomoću HNMPA-(AM3) ili puta PI-3/AKT kinaze (aktiviranog inzulinskim tretmanom) s Wortmaninom inhibira sintezu kolagena.HNMPA-(AM3) je smanjio ekspresiju gena Col2, Col11 i IR, kao i Sox6 i -9.Ko-imunoprecipitacijske i imunoprecipitacijske analize hromatinom ćelija tretiranih HNMPA-(AM3) pokazale su vezivanje koaktivatora Sox6 i Med12 sa Sox9, ali smanjeno vezivanje Sox9-Col2a1. Opisujemo novu metodu kulture koja omogućava povećanje broja hondrocita i promociju formiranje tkiva hrskavice nalik hijalinu, dijelom inzulinom posredovanim vezivanjem Sox9-Col2a1.Pogodnost tkiva stvorenog ovim pristupom za upotrebu u reparaciji zglobova treba ispitati in vivo.