X-GAL CAS:7240-90-6 98% bijeli do gotovo bijeli kristalni prah
| Kataloški broj | XD90008 |
| ime proizvoda | X-Gal (5-bromo-4-kloro-3-indolil-beta-D-galaktopiranozid) |
| CAS | 7240-90-6 |
| Molecular Formula | C14H15BrClNO6 |
| Molekularna težina | 408.63 |
| Detalji o skladištenju | -2 do -6 °C |
| Usklađena tarifna šifra | 29400000 |
Specifikacija proizvoda
| Izgled rješenja | Bistra, bezbojna do svijetložuta otopina (50 mg/ml u DMF:MeOH, 1:1) |
| Specifična optička rotacija | -61,5 +/- 1 |
| Izgled | Bijeli do gotovo bijeli kristalni prah |
| Purity HPLC | min 99% |
| Rastvorljivost (5 % u DMF) | Rastvorljivo (5% w/v, DMF) |
| Voda KF | max 1% |
| Test (HPLC na bezvodnoj bazi) | min 98% w/w |
Upotreba X-gal
X-gal (takođe skraćeno BCIG za 5-bromo-4-kloro-3-indolil-β-D-galaktopiranozid) je organsko jedinjenje koje se sastoji od galaktoze povezane sa supstituiranim indolom.Spoj je sintetizirao Jerome Horwitz i saradnici 1964. Formalni kemijski naziv se često skraćuje na manje precizne, ali i manje glomazne fraze kao što je bromokloroindoksil galaktozid.X iz indoksila može biti izvor X u kontrakciji X-gal.X-gal se često koristi u molekularnoj biologiji za testiranje prisustva enzima, β-galaktozidaze, na mjestu njegove uobičajene mete, β-galaktozida.Također se koristi za otkrivanje aktivnosti ovog enzima u histohemiji i bakteriologiji.X-gal je jedan od mnogih indoksil glikozida i estera koji daju netopiva plava jedinjenja slična indigo boji kao rezultat enzimski katalizirane hidrolize.
X-gal je analog laktoze i stoga može biti hidrolizovan enzimom β-galaktozidaze koji cijepa β-glikozidnu vezu u D-laktozi.X-gal, kada se cijepa β-galaktozidazom, daje galaktozu i 5-bromo-4-kloro-3-hidroksiindol - 1. Potonji se zatim spontano dimerizira i oksidira u 5,5'-dibromo-4,4'-dihloro -indigo - 2, intenzivno plavi proizvod koji je nerastvorljiv.Sam X-gal je bezbojan, tako da se prisustvo plavo obojenog proizvoda može koristiti kao test za prisustvo aktivne β-galaktozidaze.Ovo također omogućava da se bakterijska β-galaktozidaza (tzv. lacZ) koristi kao reporter u različitim aplikacijama.
U dvohibridnoj analizi, β-galaktozidaza se može koristiti kao reporter za identifikaciju proteina koji međusobno djeluju.U ovoj metodi, biblioteke genoma se mogu pregledati na interakciju proteina pomoću kvasca ili bakterijskog sistema.Tamo gdje postoji uspješna interakcija između proteina koji se testiraju, to će rezultirati vezivanjem aktivacijske domene za promotor.Ako je promotor vezan za lacZ gen, proizvodnja β-galaktozidaze, koja rezultira stvaranjem plavo pigmentiranih kolonija u prisustvu X-gal, stoga će ukazivati na uspješnu interakciju između proteina.Ova tehnika može biti ograničena na skrining biblioteke veličine manje od oko 106. Uspješno cijepanje X-gal također stvara primjetno neugodan miris zbog isparavanja indola.
Kako je X-gal sam po sebi bezbojan, prisustvo plavo obojenog proizvoda može se koristiti kao test za prisustvo aktivne β-galaktozidaze.
Ova laka identifikacija aktivnog enzima omogućava da se gen za βgalaktozidazu (lacZ gen) koristi kao reporterski gen u različitim aplikacijama.
