ONPG CAS:369-07-3 98,0% min od bijelog do potpuno bijelog praha
| Kataloški broj | XD90006 |
| CAS | 369-07-3 |
| ime proizvoda | ONPG (2-nitrofenil-beta-D-galaktopiranozid) |
| Molecular Formula | C12H15NO8 |
| Molekularna težina | 301.25 |
| Detalji o skladištenju | 2 do 8 °C |
| Usklađena tarifna šifra | 29400000 |
Specifikacija proizvoda
| čistoća (HPLC) | Min.98,0% |
| Izgled | Bijeli do gotovo bijeli prah |
| Rješenje(1% u vodi) | Bistra, bezbojna do blago žuta otopina |
| Sadržaj vode(Karl Fisher) | Max.0,5% |
| Specifična optička rotacija [α]D20(c=1, H2O) | - 65,0 °C do -73,0 °C |
Diskusija o ONPG testu (β-galaktozidazni test)
Nedavno su se često postavljala pitanja: 1. Zašto se ONPG test može koristiti za razlikovanje odgođene fermentacije laktoze?2. Zašto nacionalni standard navodi da je potrebno koristiti 3% natrijum hlorid trisaharidnog gvožđa (ili trisaharidnog gvožđa) za ONPG test?3. Za Vibrio parahaemolyticus, prilikom izvođenja OPNG testa, zašto bi se toluen dodavao kap po standardu?Koja je funkcija?
Naša kompanija je pregledala mnogo informacija, sažela ih i podijelila s vama u nastavku:
Princip: Kineski naziv ONPG-a je o-nitrobenzen-β-D-galaktopiranozid.ONPG se može hidrolizirati u galaktozu i žuti o-nitrofenol (ONP) pomoću β-galaktozidaze, tako da se aktivnost β-galaktozidaze može otkriti promjenom boje podloge za kulturu.
Laktoza je šećer koji većina mikroorganizama treba da otkrije.Za njegov metabolizam potrebna su dva enzima, jedan je ćelijska permeaza, laktoza ulazi u ćelije pod djelovanjem permeaze;druga je β-galaktozidaza, koja hidrolizuje laktozu u galaktozu.Laktoza i glukoza.β-galaktozidaza može direktno djelovati na ONPG kako bi ga hidrolizirala u galaktozu i žuti o-nitrofenol (ONP).Može se obaviti za 24 sata, čak i sa laktoznim odloženim fermentorima.Stoga, objašnjava rezultate posmatranja branja kulture 1 sa kosog agar-a i inokulacije u punom krugu na 36°C tokom 1-3h i 24h.Ako se proizvodi β-galaktozidaza, požutiće za 1-3h, ako nema tog enzima, neće promijeniti boju za 24h.
Prema gornja dva enzima, mikroorganizmi se mogu podijeliti u sljedeće kategorije:
1 bakterija koja fermentira laktozu (18-24 sata) sa permeazom i β-galaktozidazom P + G +;
2 Odloženi fermentori laktoze (traje duže od 24 sata) bez permeaze, ali posjeduju galaktozidazu: P-G+.
3 Fermentori bez laktoze kojima nedostaju i permeaza i galaktozidaza: P- G-.
ONPG test se može koristiti za razlikovanje bakterija koje fermentiraju laktozu (P-G+) od nefermentirajućih bakterija laktoze (PG-), kao što su:
1 Razlikujte kasne fermentore laktoze (P-G+) od fermentora bez laktoze (P-G-).
(a) Citrobacter (+) i Salmonella arizonae (+) iz Salmonella (-).
(b) Escherichia coli (+) iz Shigella sonnei (-).
Zašto je ONPG test izveden korištenjem kulture preko noći na 3% natrijum hlorida feri trisaharida (gvožđe trisaharida)?Naša kompanija je konsultovala mnogo informacija, ali nema jasne izjave.Samo na web stranici FDA piše da "Inokulirajte kulture koje se testiraju na trostruki šećerni željezni agar i inkubirajte 18 sati na 37°C (ili na drugoj odgovarajućoj temperaturi, ako je potrebno). Može se koristiti i % laktoze."znači: testirane bakterije su inokulirane na podlogu trisaharida gvožđa i kultivisane na 37°C tokom 18 sati.Hranljivi agar kosi (ili drugi) medijum koji sadrži 1% laktoze je takođe prihvatljiv.Stoga se zaključuje da medij trisaharida gvožđa sadrži laktozu.Nakon rasta preko noći, bakterije su proizvele dobru aktivnu β-galaktozidazu.Koristeći takve bakterije, ONPG se može brže razgraditi pomoću β-galaktozidaze.Eksperimentalni fenomen se brže i bolje manifestuje.Dodatno, dodavanje toluena u kapima i vodeno kupatilo u trajanju od 5 minuta su sve u cilju potpunog oslobađanja β-galaktozidaze.
