Proizvodi

Razvili smo novi sistem isporuke male interferirajuće RNK (siRNA) koristeći ternarni kompleks sa polietileniminom (PEI) i γ-poliglutaminskom kiselinom (γ-PGA), koji je pokazao efekat utišavanja i nije imao citotoksičnost.Binarni kompleksi siRNA sa PEI bili su približno 73-102 nm u veličini čestica i 45-52 mV u ζ-potencijalu.Efekat utišavanja siRNA/PEI kompleksa se povećao s povećanjem PEI, a siRNA/PEI kompleksi sa omjerom naboja većim od 16 pokazali su značajno srušenje luciferaze u ćelijskoj liniji karcinoma debelog crijeva miša koja redovno eksprimira luciferazu (Colon26/Luc ćelije).Međutim, jaka citotoksičnost i aglutinacija krvi uočeni su u kompleksu siRNA/Lipofectamine i siRNA/PEI16 kompleksu.Dopunjavanje kationskih kompleksa anjonskim jedinjenjem je objavljeno kao obećavajuća metoda za prevazilaženje ovih toksičnosti.Stoga smo pripremili ternarne komplekse siRNA sa PEI (omjer punjenja 16) dodatkom γ-PGA da smanjimo citotoksičnost i dostavimo siRNA.Kao što se očekivalo, citotoksičnost ternarnih kompleksa se smanjivala sa povećanjem sadržaja γ-PGA, što je smanjilo ζ-potencijal kompleksa.Snažan efekat utišavanja uporediv sa kompleksom siRNA/Lipofectamine otkriven je u ternarnim kompleksima uključujući γ-PGA sa anjonskim površinskim nabojem.Visoka inkorporacija ternarnih kompleksa u ćelije Colon26/Luc potvrđena je fluorescentnom mikrokopijom.Nakon što je postignut nokdaun egzogeno transficiranog gena, sposobnost kompleksa da posreduje u nokdaunu endogenog gena za održavanje domaćinstva, gliceraldehid 3-fosfat dehidrogenaze (GAPDH), procijenjena je u B16-F10 ćelijama.Ternarni kompleks (siRNA/PEI16/γ-PGA12 kompleks) pokazao je značajan GAPDH knockdown efekat.Stoga smo razvili koristan sistem isporuke siRNA.