Proizvodi

Efekti deterdženata na aktivnost P-glikoprotein atpaze: razlike u perturbacijama bazalnih i verapamil zavisnih aktivnosti.

P-glikoprotein (P-gp), glikoprotein plazma membrane povezan s fenotipom multirezistencije na lijekove, odgovoran je za ATP-ovisan efluks različitih amfifilnih lijekova.Koristeći membranske vezikule pripremljene od ćelijske linije DC-3F/ADX otporne na više lijekova, proučavali smo perturbaciju bazalnih (tj. u odsustvu lijeka) i verapamil zavisne aktivnosti P-gp ATPaze inducirane različitim deterdžentima, pri nesolubiliziranju, kao i pri solubilizaciji, koncentracijama.Progresivna solubilizacija membrane s povećanjem koncentracije deterdženta praćena je raspršivanjem svjetlosti i eksperimentima centrifugiranja.Za koncentracije deterdženta koji ne otapaju, svi testirani deterdženti osim DOC-a izazvali su djelomičnu inhibiciju aktivnosti P-gp ATPaze, koja nije bila u korelaciji s količinom različitih testiranih deterdženata ugrađenih u membrane.Analiza aktivacije P-gp izazvane verapamilom otkriva da je aktivnost P-gp ATPaze različito modulirana različitim deterdžentima u koncentracijama koje ne otapaju.Stoga je vjerojatnije da će se dogoditi specifične interakcije između P-gp-a i deterdženata nego globalne perturbacije membrane.Nakon solubilizacije različitim testiranim deterdžentima, bazalna aktivnost P-gp ATPaze bila je praktički potpuno inhibirana, osim u prisustvu CHAPS-a koji je bio u stanju da očuva ovu aktivnost na nivou koji je uporediv sa onim izmjerenim u nativnim membranama.Međutim, verapamil-indukovana aktivacija P-gp ATPaze izgubljena je tokom solubilizacije P-gp pomoću CHAPS-a, ali se oporavila nakon razrjeđivanja CHAPS-a ispod njegove kritične micelarne koncentracije.Ova zapažanja ukazuju na specifične interakcije između P-gp i CHAPS molekula unutar miješanih micela.U cjelini, naši podaci koji dokazuju specifične interakcije P-gp/deterdženti su u skladu s lokacijom transportnih mjesta lijeka na P-gp transmembranskim domenima.